查士丁一世
518年，禁卫军首领查士丁即皇帝位，指定其侄子查士丁尼一世为继位人。
527年，查士丁尼一世被授予奥古斯都尊号，与叔父查士丁共同执政。
527年8月，查士丁去世，查士丁尼一世(527-565年在位)成为东罗马帝国唯一的皇帝。
查士丁尼一世
6世纪时，拜占廷帝国有东方、色雷斯和伊利里亚三大军区。528年，设立了亚美尼亚军区;537年，又设立了海上军区。边防军士兵从政府那里领取农田，自己耕种或雇人耕种，提供自给自足的军粮。边防军和野战军的最基层单位为队，每队5人;两队为一连;10连为一营;6营为一团;3至4团为一师;3至4师组成一个军团。
查士丁尼在世时，共完成三部法律汇编。即《查士丁尼法典》、《查士丁尼法学总论》、《查士丁尼学说汇纂》;其死后法学家又完成了《查士丁尼新敕》("新律")。这四部法律统称为《查士丁尼国法大全》(又译民法大全)，又称查士丁尼法典。《国法大全》是罗马法发展史上的集大成之作，其出台是对罗马法1000年来发展的归纳和总结，无论是对罗马法体系还是对其他法律体系，无论对当时还是后世，都有着非常重要的意义。 查士丁尼法典的颁布标志着罗马法发展到完备阶段，他保留了罗马法在法学方面的创造性成果，对人们的行为作出法律规范为复杂的社会矛盾的调节提供了法律手段。它也对后世资本主义国家的法律制定起到了蓝本作用，近代西欧多数国家在制定法令时都将该法典作为参考。
532年，尼卡暴动。在赛车会上，蓝党、绿党两党下层因对官吏横暴和苛税不满，要求罢免特里博尼安和卡帕多西亚的约翰两个暴吏，释放两党被囚禁成员。遭拒绝后爆发了声势浩大的起义，起义群众捣毁监狱，焚烧官邸。大火持续3天，焚毁了圣索菲亚大教堂等公共建筑物，并蔓及皇宫。查士丁尼一世撤换两个宠臣后，亲赴赛车场说服起义者，未能奏效。训练有素的政府军节节败退，全城除皇宫外均被起义者控制。关键时刻，皇后狄奥多拉阻止丈夫查士丁尼一世逃离首都。随后，查士丁尼一世施展阴谋，一面派贝利萨留组织蛮族雇佣军，一面派人收买蓝党。起义第八天，蓝党突然倒戈，起义军阵脚顿乱。蛮族雇佣军屠杀起义群众约3万余人。在皇后狄奥多拉要求下，绿党领袖希巴提乌斯及其家族也被诛杀殆尽。查士丁尼的镇压改变了罗马公民参与政治的传统，甚至连赛车这种传统体育活动后来也被逐渐取消了。
532年-537年，查士丁尼一世重修并扩建"圣索菲亚大教堂"。 这座教堂后来成为拜占庭宗教生活和东正教的中心。
553年，查士丁尼一世为缓和东正教与一性派之间矛盾，主持了东正教和一性派主教的联合会议。
533年，查士丁尼一世集中兵力向西发动战争。
534年，查士丁尼一世派贝利萨留灭汪达尔-阿兰王国，兼并北非，占领撒丁岛和科西嘉岛。查士丁尼为统治被征服的领土，在迦太基设立阿非利加长官府和督军署。查士丁尼把被汪达尔人侵占的土地发还给当地居民和天主教会。为了庆祝国土的光复，君士坦丁堡为贝利萨留举行盛大的凯旋仪式。
535年，查士丁尼一世侵入东哥特王国，遭到猛烈抵抗。
541年，波斯军队又从北方侵入拉齐卡地区。查士丁尼再次任命贝利萨留指挥东方战场，进行一系列反击。双方约在561年底媾和，签订为期50年的和约。
542年春天，大瘟疫给拜占庭帝国造成了第一次毁灭性打击，瘟疫起自尼罗河沼地，毁灭了帝国三分之一的人口，仅在君士坦丁堡，就有逾半数居民死亡。秋天，瘟疫消失了，然而在此后70年里又多次卷土重来，毁掉了东罗马帝国赋税和兵员来源，使东罗马帝国货币处于崩溃边缘，而领土丧失也很快导致了君士坦丁堡粮食供应减少。
552年，查士丁尼一世出兵干涉西哥特王国，占领西班牙东南部。
554年，东哥特王国最终被查士丁尼一世派兵灭亡。
查士丁二世
565年，查士丁二世(狄奥多拉侄女婿兼养子)继位。
568年，伦巴第人从北方翻越阿尔卑斯山，入侵亚平宁半岛，建立伦巴第大公国(568-774年)。查士丁二世不得不放弃了意大利北部和东部地区。此后拜占庭又遭阿瓦尔人入侵。
571年，查士丁二世和突厥联合和波斯再起战端。但在叙利亚大败于波斯库斯鲁一世(库思老一世)。
572年，伦巴第人定都帕维亚。东罗马帝国只保留拉文纳一带狭长的地带。
574年，查士丁二世不得不退休，以养子提比略二世为凯撒(副皇帝)。
提比略二世
578年，提比略二世继位。提比留以查士丁一世侄孙之岳父这点亲戚关系，得以继续维持查士丁尼王朝世系。
莫里斯一世
582年，莫里斯一世(582-602年，提比略二世女婿)继位。
590~604年，教皇格列高利一世在位，认为教皇是上帝指派的全部教会的首脑，将教皇的影响扩大到自己的辖区以外。
591年，莫里斯一世干涉波斯内乱，白赫兰·楚宾的军队在经过两次激烈战斗后被彻底击溃，他本人则走投无路，最后几经辗转进入了突厥人领地。库思老二世重新入驻泰西封。
594至600年，得益于能干的普里斯库斯将军卓越领导，拜占庭帝国军队不但成功遏制住阿瓦尔人南进步伐，还难得地在与草原蛮族较量中占据上风，这还自查士丁尼一世皇帝晚年以来第一次。
601年，拜占庭帝国与阿瓦尔人在蒂萨河岸进行最后决战，伯颜可汗彻底战败，丧失了4个儿子和近3万人军队。于是，罗马人自3世纪撤出达契亚以来，第一次再度踏上多瑙河下游北岸的匈牙利土地。这次大捷后，普里斯库斯将军或许是由于功勋过于显赫，招致了莫里斯一世嫉恨，不久神秘死去。
福卡斯
602年，普里斯库斯将军部下福卡斯率军出征多瑙河流域的阿瓦尔人，到了多瑙河后，福卡斯率军哗变，转而南下返回首都，发动政变，杀了莫里斯一世皇帝，即位为皇帝。并在首都大肆屠杀反对者。
604年，莫里斯一世女婿库思老二世亲自率兵出征，随军带有一名自称莫里斯皇帝之子狄奥多西的傀儡，夺取亚美尼亚、两河流域和叙利亚大片地区。面对各地反抗，福卡斯皇帝只能采用残酷杀戮来对付帝国名门贵族，结果杀人越多，敌人也越多。当时帝国时局可以说已经达到了最坏的境地。
606年，波斯库斯老二世趁拜占庭内乱，再次入侵。
608年，拜占庭北非总督希拉克略起兵反对福卡斯，内战爆发。福卡斯派东方总督前去讨伐希拉克略，但被希拉克略之子尼斯塔斯击败，而波斯也趁拜占庭东方部队前往埃及之机，攻陷了叙利亚和美索不达米亚的大部分东方行省，并深入安纳托利亚半岛。
610年，希拉克略大军抵达君士坦丁堡城下，福卡斯城防部队和希拉克略通络，希拉克略未经抵抗便占领了首都，抓获并砍了福卡斯的脑袋。希拉克略登基，由此开始了拜占庭希拉克略王朝。
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